274 JOURNAL OF THE SOCIETY OF COSMETIC CHEMISTS Maltose und Glucosamin unter physiologischen Bedingungen behandelt worden waren. METHODIK Geminnung and Reinigung des Hornschichtschabsels Das mir einem Mikrotommesser gewonnene Hornschichtschabsel yon Versuchspersonen in einem Durchschnittsalter yon etwa 30 (22-43) Jahren wurde zur Entfernung der 16slichen lnhaltsstoffe grtindlich mir Wasset und nachfolgend mit •thanol und 2_ther gereinigt und im Exsikkator getrocknet. Kondensation: Hornschichtschabse1-3- Kohlenh_ydrate Die Hornschichtschabsel wurden jeweils mit den gleichen Mengen an Kohlenhydraten (ZUK, Desoxyribose, Glucosamin, Xylose, Arabinose, Maltose, Rhamnose, Sorbose) mir wenig Wasset zu einem Brei verrtihrt und 1 Woche bei 37 ø und 65% tel. Luftfeuchtigkeit stehengelassen. Arischile- Bend wurden alle Ans•itze (inklusive Kontrolle) etwa 2 Tage lang gegen Wasset dialysiert. Nach einer weiteren Reinigung mit 70 vol.-ø/0 igem Athanol wurden die Substanzen im Exsikkator getrocknet. Kohlenh_ydratebestimmungen wurden an Kontroll-Hornschichtschabsel und Hornschichtschabsel, das mir ZUK behandelt war, vorgenommen. Am geeignetsten erschien die modifizierte Ka[Fe(CN)6]-Methode [Park und Johnson (20)], die sehr emp- findlich ist und auch Kohlenhydrate der Kohlenhydrate-Aminosiiuren-Ver- bindungen miterfaBt [Heyns und Rolle (19)]. Dieset Bestimmung ging jedoch eine Hydrolyse voraus, um das Hornmaterial zur Erfassung aller Kohlenhydrate aufzuschlieBen. Bestimmungen der freien e-•Iminogruppen des Lysins der Skleroproteine der Hornschicht Die Bestimmung der freien e-Aminogruppen wurde in Anlehnung an die DNP-Methode durchgeftihrt [Sanger (21), Heyns und K6nigsdorf (22), Heyns und Wolf (23), Heyns und Leglet (24)]. ERGEBNISSE Nachmeis einer Skleroprotein-Kohlenh_ydrate-Bindung and Nach•veis der Bindung yon 27UK an Skleroproteine Es ergab sich, dab die isolierten Skleroproteine der Hornschicht normaler- weise bereits 2,73% Kohlenhydrate gebunden enthalten. Nach 7tiigiger Einwirkungszeit yon ZUK auf Hornschichtschabsel stieg der Kohlenhydrate-

EINFLUSS DER BINDUNG VON KOHLENHYDRATEN 275 gehalt auf 4,04% an. DaB die Kohlenhydrate des ZUK an freie e-Amino- gruppen des Lysins der Skleroproteine der Hornschicht gebunden sind, zeigt Tabe//e I. Ihrer Spalte 1 ist zu entnehmen, dab an die unbehandelten Sklero- Tabelle I Ergebnisse der Bestimmungen der Kohlenhydrate, der gebundenen und freien e-Aminogruppen des Lysins der Skleroproteine der Hornschicht. 1 2 3 4 5 6 mMol besetzte Kohlen- Freie e-Amino- Freie analy- Kohlen- e-Amino- hydrate an gruppen e-Amino- tisch** hydrate* / gruppen Sklero- in gruppen erfaBtes 100 g des Lysins proteine mMol/100g des Lysins Lysin Sklero- gebunden Sklero- proteine in % proteine in % in % Skleroproteine 15,2 27,5 100 40,0 72,5 8,08 Nach 7t•igiger Einwirkung von ZUK auf die Skleroproteine 22,4 41,6 151 31,5 58,4 7,88 * bezogen auf Glucose ** Lysingehalt des Keratins: 7,9% (25) proteine der Hornschicht bereits Kohlenhydrate gebunden sind. Nach Ein- wirkung von ZUK steigt der Kohlenhydrategehalt der Skleroproteine an. In Spalte 2 sind die dutch Kohlenhydrate besetzten e-Aminogruppen des Lysins in Prozenten der insgesamt vorhandenen e-Aminogruppen des Lysins angegeben. Spalte 3 gibt die dutch die Behandlung der Hornschicht mir ZUK zus•itzlich gebundenen Kohlenhydrate wieder, wenn man den Kohlen- hydratgehalt der unbehandelten Skleroproteine der Hornschicht = 100 setzt. In Spalte 4 sind die freien e-Aminogruppen des Lysins, bestimmt nach der DNP-Methode, in mMol/100 g Skleroproteine der Homschicht ange- fiihrt. Hier besitzen die unbehandelten Skleroproteine die meisten freien e-Aminogruppen des Lysins, w•ihrend nach Einwirkung von ZUK dieser einen Teil der freien e-Aminogruppen besetzt. Diese Werte stehen in guter Korrelation zu den in Spalte 1 angegebenen Kohlenhydratewerten. Aus S p a lt e 6 ist die gute Obereinstimmung des erfaBten Gesamtlysins der Sklero- proteine der Hornschicht mit den in der Literatur angegebenen Lysingehalt- werten des Keratins zu ersehen. Freie •-Aminogruppen des Lysins der Skleroproteine nach Behandlung mir anderen Kohlenhydraten Besfimmungen der freien •-Aminogruppen des Lysins der Skleroproteine wurden auch nach Behandlung reit Desoxyribose, Arabinose, Xylose, Rham-