CHARAKTERISIERUNG VON KOPFSCHUPPEN MITTELS ZELLBIOLOGISCHER PARAMETER Gerh•trd Sauermann*, Renate Hasselmann, Hans-Joachim Kopplow, Ute Heinbockel Synopsis: Ultrasonic disaggregation of dandruff scales into individual epithelial cells and fat droplets was followed with the aid of light scattering photometry. The ratio of the amount of disaggregation at zero time and that after 10 minutes -- as measured by the light scattering index SI -- corre- lates well with a visual classification according to size of scales from 13 test subjects. SI correlates well with the volume of the individual epithelial cells forming the cell clusters, with the lipid content, and presumably also with transepidermal water loss. Transepidermal water loss is consistently correlated with cell volume. PROBLEMSTELLUNG Schuppen stellen ein weitverbreitetes iisthetisches Problem dar, unter dem in der Bundesrepublik viele Millionen Menschen leiden. In ihren schweren Erscheinungs- formen, z. B. der seborrhoeischen Dermatitis' darf von krankhaften Erscheinungen gesprochen werden. Mittels standardisierter Entnahmemethoden gewonnene Epithelzellen dienten in frtiheren Untersuchungen als Proben, um die Intensitiit der StiSrung der Epithelzell- abschilferung und den Normalisierungsverlauf bei Behandlung zu verfolgen. Bei diesera ,,corneocyte-count" genannten Verfahren werden mittels einer wiigrigen, tensidhaltigen LiSsung von einer definierten Oberfliiche mittels standardisierter Ent- nahme-Technik einzelne Epithelzellen und Zellcluster gewonnen, wob•i letztere' unter dem Einflug des Tensids zu einzelnen Ephitelzellen separieren. Die GriSge der Schuppen und ihre morphologischen Charakteristika werden auf diese Weise nicht erfagt. Nun stellt aber nicht nur die Schuppenmenge, sondern auch die Schuppen- griSge eine wichtige EinfluggriSge des Problems ,,Kopfschuppen" dar. Sie kiSnnte mbglicherweise ein Mag fiir die Kopfschuppen bekiimpfende Wirksamkeit yon Haarpfiegeprodukten darstellen. Die Suche nach einer einfachen, praktikablen Me- thode zur Charakterisierung der Schuppengrbge und die Beziehungen dieser GriSge zu anderen Epithelzellpari•metern war das Ziel dieser Arbeit. * Biophysikalisches Met•laboratorium d. Firma Beiersdorf AG, Hamburg 201
202 JOURNAL OF THE SOCIETY OF COSMETIC CHEMISTS EXPERIMENTELLES Zur L/3sung dieser Probleme gingen wir folgendermaf•en vor: Die Auswahl der Probanden erfolgte nach visueller Prtifung auf Schuppenh•iufigkeit beim K•immen und gem•if• der Bekundung der Probanden, dat• sie an Schuppen litten. 12 Probanden nahmen an diesera Versuch tell. Die Probengewinnung erfolgte durch Ausk•immen der Schuppen auf glattes, faserarmes Papier im Zeitraum von 1 Woche unter Beibehaltung der individuellen Haarpflege und unter Verwendung von Haarpflegeprodukten, deren Wirkungslosigkeit gegen Schhppen bekannt ist. Die verwendeten Methoden gliederten sich wie folgt: a) subjektive visuelle Klassifizierung der Schuppen nach Grt3f•e (3 Klassen) b) Streulichtmessung zur objektiven Klassifizierung nach Gr/3ge 2 mg Schuppen wurden unter sanftem Schtitteln in isotonischer Kochsalzl/3sung dispergiert die Streulichtmessung wurde mittels weigen Lichtes und unter dem Winkel yon 90 ø reit einem kommerziellen Trtibungsphotometer (Fa. Lange) vorgenommen an- schlietgend wurden die Proben unter standardisierten Bedingungen 10 x 1 min in einem Ultraschallbad behandelt und der Anstieg des Streulichtes verfolgt zur Ermittlung des Streulichtindex wurde das reit dem Faktor 100 multiplizierte Verh•iltnis aus Streulichtmenge vor Beginn der Ul. traschallbehandlung zu der Streulichtmenge nach Beendigung der Ultraschallbehandlung betrachtet und der Mittelwert aus 5 Versuchen gebildet c) Die Bestimmung des Volumens erfolgte anhand der nach dem Ende des Dis- pergierens vorliegenden Suspension vereinzelter Epithelzellen mittels eines Coulter-Counters TF den Keratinisierungsindex bestimmten wir nach der Anf•irbung eines Ausstrichs als Verh•iltnis yon kernlosen Zellen zur Gesamtzahl der ausgez•ihlten Zellen (= 100) (Firbung gem. Papanicolaou) e) der Fettgehalt wurde an je 5 mg Material bestimmt die mit Hexan extrahier- baren Oberfi•ichenlipide wurden nach dem Verdunsten des L/3sungsmittels bei 180øC reit Schwefels•iure verkohlt und die Extinktion der Suspension des Ruf•es bei 360 nm photometrisch bestimmt (Mittelwert aus 3 Bestimmungen) f) der transepidermale Wasserverlust (TEWL) wurde mittels des Evaporimeters der Fa. Servomed/Stockholm an 5 verschiedenen Stellen der Kopfhaut bei ge- sunden und an Schuppen leidenen Probanden ermittelt. STATISTISCHE AUSWERTUNG Die einzelnen Metgreihen wurden auf Normal- bzw. logarithmisch-Normalvertei- lung mir Hilfe des KOLMOGOROW-SMIRNOW-Tests geprtiPc. Signifikanztests auf Mittelwertunterschied wurden tiber den Student'schen t-Test durchgeftihrt. Ab- h•ingigkeiten zwischen den einzelnen Merkmalen wurden tiber die Korrelationsre&- nung untersucht. ERGEBNISSE Tabelle 1 zeigt die Mittelwerte der zu 12 bzw. 13 Probanden geh/3renden Mef•para- meter, die Medianwerte der Verteilung samt ihren Standardabweichungen.
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