ANALYSIS OF OXIDATIVE HAIR DYES 101 3.1 Detektion 3.1.1 UV-Absorption Da es sich bei allen Oxidationsfarbstoffen um aromatische Verbindungen handelt, ist der Nachweis durch Betrachten des entwickelten Chromatogramms unter der UV-Lampe bei 254 nm m6glich die Substanzen sind als dunkle Flecke gegen den Plattenuntergrund sichtbar (Fluoreszenzminderung). Zur Absicherung bei der Identifizierung in zweifelhaften Fiillen kann die UV-Absorp- tion dazu verwendet werden, mit Hilfe des Densitometers (s. Abschnitt 4) das Spektrum der Substanz aufzunehmen, indem von dem Fleck bei verschiedenen Wellenliingen, im Abstand von 5 nm oder 10 nm, in kurzen riiumlichen Abstiinden auf einem Schreiber Re- missiol•s-Orts-Kurven aufgenommen werden. Eine h6here Nachweisempfindlichkeit erhiilt man, wenn die Diinnschichtplatte reit einem der folgenden Detektionsmittel bespriiht wird augerdem ist damit eine bessere Differenzierung der Oxidationsfarbstoffe m6glich. 3.1.2 Ehrlichs Reagenz 1 g 4-Dimethylaminobenzaldehyd (Fa. Merck) werden in 100 ml •thanol ge16st, dann 2 ml Salzsiiure 38%ig zugegeben. 3.1.3 Gibbs Reagenz 1 g 2,6-Dichlorchinonchlorimid (Fa. Merck) werden in 100 ml •thanol ge16st. Nach dem Bespriihen wird die Diinnschichtplatte mit Ammoniak-Dampf behandelt, indem sie fiir kurze Zeit in ein Glasgefiig gestellt wird, das mit einigen ml konz. Ammoniak beschickt ist. Oxidationsfarbstoff Ehrlichs Reagenz GibbsReagenz Echtblausalz 2,5-Diaminotoluol orange braun graublau p-Phenylendiamin rot braun grau 2,4-Diaminotoluol gelb blau braun 2,6-Diaminotoluol gelborange blau rotviolett 2,4-Diaminoanisol gelborange blau braun 2,5-Diaminoanisol rot grau grau 2,4-Diaminophenetol gelborange blau braun 4,4'-Diaminodiphenylamin purpur violett braun N,N-Diiithyl-p-phenylendiamin gelb rot grau Resorcin (schwach violett n. Erwiirmung) violett rotviolett Brenzcatechin - braungelb braun Pyrogallol - braun braun 1-Naphthol - violett violett 2,7-Dihydroxynaphthalin - violett violett 2-Methylresorcin - violett orange 4-Chlorresorcin - violett rotvio|ett 4-Aminophenol gelb braun braun 3-Aminophenol gelb violett rotbraun 2-Aminophenol gelb gelb gelbbraun 2-Hydroxy-4-aminotoluol gelb violett braun N,N-Diiithyl-3-aminophenol - blau rot 1,4-Diamino-2-nitrobenzol gelborange braun graubraun 2-Amino-4-nitrophenol gelb braungelb braun Tabelle 1 Anfiirbung yon Oxidationsfarbstoffen auf der Diinnschichtplatte

102 JOURNAL OF THE SOCIETY OF COSMETIC CHEMISTS 3.1.4 Echtblausalz B 1 g Echtblausalz B (tetraazotiertes Di-o-anisidin, Fa. Merck) wird in 100 ml Wasser gel/Sst. Die Anf•/rbungen der untersuchten Oxidationsfarbstoffe auf der Dtinnschichtplatte nach Besprtihen reit diesen Nachweisreagenzien sind in Tabelle 1 verzeichnet. 3.2 Flief•mittelgemische Je nach Kombination der Oxidationsfarbstoffe wurden ftir die D•innschichtchromato- graphie verschiedene Flietgmittelgemische verwendet. Zur Absicherung bei der Identi- fizierung mtissen im allgemeinen mehrere Dtinnschichtchromatogramme reit unter- schiedlichen Flietgmittelgemischen angefertigt werden. Zur Unterscheidung und quan- titativen Bestimmung der oben genannten 23 Oxidationsfarbstoffe wurden 6 Flietg- mittelgemische ausgew•/hlt. Die RF-Werte der Substanzen und damit die Trennung yon Gemischen ist u. a. abh•/ngig yon der Dampfraums•/ttigung in der Entwicklungskammer und yon der relativen Feuchtigkeit (vor allera bei unpolaren Flietgmittelgemischen). Besonders bei kritischen Trennungen wurden daher diese Bedingungen standardisiert: Die Kammers•ittigung wurde durch Beschicken der Kammer mit dem Fief•mittelgemisch mindestens 1/2 Stunde vor Einstellen der Dtinnschichtplatten erzielt. Die relative Feuchte wurde geregelt, in- dem der zweite Trog mit Wasser gef•illt wurde. Konditionierung der Entwicklungs- kammer 3-5 h, desgl. Konditionierung der Dtinnschichtplatte ca. 30 Min. vor Auf- tragen der Substanzen. Unterschiedliche relative Feuchten kt3nnen eingestellt werden durch Verwendung yon entsprechenden Schwefels•/ure-Lt3sungen. In folgender Aufstellung sind die verwendeten Flief•mittelgemische und die jeweilige optimale rel. Feuchte verzeichnet: Fliegmittel 1 Toluol 7,0 ml 2-Butanol 3,0 ml rel. Feuchte 97-100 % Flief•mittel 2 Toluol 6,5 ml 2-Butanol 3,0 ml Essigs•iure 0,5 ml rel. Feuchte 97-100 % Flief•mittel 3 Chloroform 6,0 ml Cyclohexan 2,5 ml 2-Butano! 1,5 ml 2. Trog: Wasser 9,0 ml Ammoniak konz. 1,0 ml Flief•mittel 4 Chloroform 8,0 ml Essigs•iure 2,0 m! re!. Feuchte 97-100 % Flief•mittel 5 Di•/thyl•ither 10,0 ml rel. Feuchte 97-100 % Flief•mittel 6 Essigs•iure•ithylester 8,0 ml Ameisens•/ure 1,0 ml Wasser 1,0 ml rel. Feuchte 97-100 % In der Tab. 2 sind die RF-Werte der Oxidationsfarbstoffe bei Verwendung der verschie- denen Flief•mittelgemische verzeichnet.