PRESERVATIVE PENETRATION OF COSMETICS 49 Struktur O I CH 3 Name Coffein Mol. gew. Konzentr. Dosis mM/I pg/cm 2 194 6,2 4,54 HO N---N CH30'• N 0H3)3CI- HO N-----N Basic Red 76 330 1 1,24 Cl 12245 Basic Brown 16 321 1 1,21 CT 12250 HO NO2 N• N --/--• I•IH •'(CH3)3Cl- N=N I• O I• 3-- CH 3 [•• NH _(6H2)3._ OH3 Basic Brown 17 402 1 1,52 CI 12251 Basic Yellow 56 337 5 6,36 CT 12719 C ext. N•-(CH2) Blau 12 348 1 1,31 CT 61554 •SO3H C ext. Gelb 10 353 1 1,33 CI 13065 Tab. 1 Obersicht tiber die untersuchten Substanzen

50 JOURNAL OF THE SOCIETY OF COSMETIC CHEMISTS Die Substanzen wurden in 40%igem, wiigrigem 2-Propanol geliSst. CI 61554 wurde in 70%igem 2-Propanol geliSst. Die Anwendungskonzentration betrug bei Coffein 6,2 mM/1, bei CI 12719 5 mM/1, fiir die iibrigen Substanzen 1 mM/1. - Probanden Miinnliche Versuchspersonen im Alter von 20-55 Jahren, eine starke Sonnenexposition mugte mindestens 4 Wochen zuriickliegen. - Versuchsdurchfiihrung Zur Messung der Hautpenetration von jeweils 2 Substanzen wurden 10 Probanden herangezogen, denen Coffein bzw. Farbflecke (5,3 cm 2) auf jeden Unterarm durch Applikation yon 20 •tl der Testli3sungen aufgetragen wurden. Nach 10 Minuten bzw. 6, 24, 48 und 72 Stunden wurde bei jeder Versuchsperson ein Farbfleck pro Arm durch 10 aufeinanderfolgende Abrisse mit ©Tesafilm-Spezial entfernt. Zwischen den Ent- nahmezeiten wurde die angef•irbte Haut unter Nichtokklusivbedingungen durch eine Moosgummischablone vor Abrieb durch die Kleidung geschiitzt. Die ©Tesafilm- Abrisse wurden auf weigen Karton aufgeklebt und bis zur densitometrischen Aus- wertung lichtgeschiitzt aufbewahrt. - Nachweis der Testsubstanzen Die Bestimmung von Coffein in den ©Tesaabrissen erfolgte durch 48stiindige Extrak- tion mit 1 ml Methanol unter Schiitteln. Der Coffeingehalt der Extrakte wurde mit einer modifizierten diinnschichtchromatographischen Methodik nach Feldheim, Reinerdes und Storm (18) ermittelt. StationSire Phase: HPTLC-Fertigplatten Kieselgel 60/F254 Merck (10 x 20 cm), Kammertyp: Camag-Linearkammer. Mobile Phase: Chloroform/ Methanol 100/2 (v/v). Laufstrecke: 6 cm. Messung: ZEISS-Chromatogramm-Spek- tralphotometer KM 3 (Mikrooptik -- 273 nm). Nachweisgrenze 0,1 ng/ml -- 18,9 ng/cm 2 Haut. Die Farbstoffe wurden auf den einzelnen Abrissen densitometrisch bestimmt (Camag- Elektrophorese-Skanner, Remission, ohne Filter, Blende 1,25 x 7,5 mm). - Stabilitiitsuntersuchung Aufgrund der im Laufe der Untersuchungen gesammelten Erfahrungen hielten wir es fiir zweckmiigig, die FarbstoffliSsungen auch auf ihre Stabilitiit unter den Versuchsbe- dingungen zu untersuchen. Je 20 •tl der TestliSsungen wurden, wie bereits beschrieben, auf fiinf benachbarte 5,3 cm 2 groge Fliichen der Unterarminnenseiten von drei bis fiinf Probanden appliziert und nach 10 Minuten mit einem •rfesafilm-Abrig entfernt. Der ©Tesafilm-Abrig eines der fiinf Flecken wurde sofort, die iibrigen nach 6, 24, 48 und 72stiindiger Lagerung bei 37 ø C und 70 - 75 % Luftfeuchte und Tageslicht auf weigen Karton geklebt und der Farbstoffverlust densitometrisch bestimmt. - Auswertung Die ermittelten PeakhiShen aus den densitometrischen Messungen bzw. die Werte der Coffeinanalysen wurden dem Ausreigertest nach Nalimov (19) unterworfen statisti- sche Sicherheit = 95 %. Folgende Werte wurden errechnet: 1. Fiir den n-ten Abrig Mittelwert xn und Standardabweichung SD von allen Proban- den pro Megzeitpunkt. 2. Pro Megzeitpunkt die Summen X der Mittelwerte xn mit den zugehiSrigen Stan- dardfehlern SD* fiir Summen von Mittelwerten.